影片讲述了新生代蜘蛛侠迈尔斯(沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音)携手蜘蛛格温(海莉·斯坦菲尔德 Hailee Steinfeld 配音),穿越多元宇宙踏上更宏大的冒险征程的故事。面临每个蜘蛛侠都会失去至亲的宿命,迈尔斯誓言打破命运魔咒,找到属于自己的英雄之路。而这个决定和蜘蛛侠2099(奥斯卡·伊萨克 Oscar Is aac 配音)所领军的蜘蛛联盟产生了极大冲突,一场以一敌百的蜘蛛侠大内战即将拉响!
胡里奥·托雷斯,蒂尔达·斯文顿,罗伯特·菲茨杰拉德·迪格斯,伊莎贝拉·罗西里尼,卡塔利娜·萨韦德拉,詹姆斯·斯卡利,莱斯·纳克里,斯派克·伊因本德,Logan J. Alarcon-Poucel,格蕾塔·李,拉里·欧文斯,Glo Tavarez,凯利·麦柯马克,Eudora Peterson,罗纳德·皮特,Greta Titelman,Shakina,西奥·马尔茨,River L. Ramirez,Sheila Moikangoa
凯特·布兰切特,凯文·哈特,杰克·布莱克,阿丽亚娜·格林布拉特,弗罗里安·穆特鲁,杰米·李·柯蒂斯,埃德加·拉米雷兹,吉娜·格申,海莉·贝内特,詹妮娜·加万卡,奥利维尔·里希特斯,鲍比·李,夏恩·杰克逊,本·戴维斯,查尔斯·巴巴洛拉,史蒂文·博耶,瑞安·雷德蒙德,Paula Andrea Placido,哈利·福特,贾斯汀·皮尔斯